烏孜別克族的先民由屬印歐語系的伊蘭人和南下的蒙古-突厥昔班尼汗國牧民混合而成。古代伊蘭人主要生活在中亞細亞的錫爾河和阿姆河流域以及澤拉夫尚河流域，也稱爲河中地區。
公元前2世紀，屬於阿爾泰語系的突厥人部落開始陸續進入中亞細亞地區。隨着交往的加深，當地土著的伊蘭人部落受其影響，逐漸演變成操突厥語的人羣。根據活動區域的不同，這部分人一直被稱爲突厥人、布哈拉人、費爾干納人、花剌子模人、撒馬爾罕人。烏孜別克族的名稱，最早來源於公元14世紀時蒙古帝國四大汗國之一的金帳(欽察)汗國的統治者蘇丹·穆罕默德·烏孜別克汗，元史上稱爲“月即別”、“月祖伯”等。金帳汗國在烏孜別克汗的統治下，國勢曾一度強盛，在當時被稱爲“烏孜別克汗國”。然而好景不長，從公元14世紀中葉開始，金帳汗國便因汗位之爭而陷入了連年的戰亂之中。到了公元15世紀，國困民乏的金帳汗國終於土崩瓦解。這時，作爲金帳汗國組成部分的白帳汗國日益強盛起來，其統治範圍內的農牧民被泛稱爲烏孜別克人。
1451年，穆罕默德·昔班尼建立起了“昔班尼汗國”，當時生活在中亞細亞水澤地帶和草原山林地帶的突厥部落，就是組成昔班尼汗國的主要部落。15世紀末至16世紀初，昔班尼汗率領烏孜別克遊牧民南下，通過多年征戰，最終確立了在河中地帶和費爾干納河流域的統治地位。
這樣，南下的烏孜別克人與當地從事農業的土著人雜居在一起，開始了新的部落間的大融合。由於南下的烏孜別克人的語言與當地部落相同或近似，加之他們在政治、經濟等領域的統治地位，從而促進了整個烏孜別克族的形成。
