新選組(しんせんぐみ、shinsengumi)是日本幕末時期一個親幕府的武士組織，也是幕府末期浪人的武裝團體。主要在京都活動，負責維持當地治安，對付反幕府人士。他們在戊辰戰爭中協助幕府一方作戰，1869年戰敗投降後解散。
新選組，外號“壬生狼”，在成立初期得到當時擔任京都守護職的會津藩主鬆平容保支持，並納入會津藩編制。新選組在1864年的池田屋事件中，重創了京都內提倡尊王攘夷的激進派。新選組最爲人所知的特色有“誠”字隊旗、衣袖上印有山形圖案的獨特羽織(一種外衣)、嚴厲的“局中法度”(爲維持組織紀律而採用的嚴厲規條)等。
新選組是民間與幕府聯合的組織，爲時任京都守護職的會津藩主鬆平容保所支持。日本幕末時期，反幕府浪士常在京都刺殺幕府官員及親幕府人士。因此，出現了新選組內部的主流派——“試衛館派”不斷肅清反對派。
文久二年(1862年)，江戶幕府將軍德川家茂上京之際，清河八郎提議募集浪士組成將軍警護，得到幕府採納。江戶幕府採取懷柔政策控制浪人，特組織浪士組。
文久三年(1863年)二月(日本舊曆，下同)，200多名浪士到達京都。清河與勤王勢力私通，企圖把那些浪士作爲天皇配置下的兵力。計劃敗露後，清河及200餘人離開京都，向江戶進發。以近藤勇、土方歲三爲中心的試衛館派及以芹澤鴨爲中心的水戶浪士留在京都。
同年三月，近藤勇、芹澤鴨等人成立新選組的前身“壬生浪士組”(又名“精忠浪士組”)，從此新選組又被稱爲“壬生狼”。他們在壬生村招募新成員，組成了36人的隊伍。京都守護職鬆平容保委派他們維持京都市內治安，對付倒幕派的浪士們。因領導人之一清河八郎與尊攘派串通而分裂，清河回江戶不久被暗殺。留在京都的近藤勇、芹澤鴨等歸屬京都守護職鬆平容保支配，組成新撰組。
同年八月十八日，政變發生，壬生浪士組協助幕府勢力有功，得到朝廷賜名“新選組”(另有說法是鬆平容保賜名“新選組”)。
文久三年(1863年)九月，近藤派肅清了芹澤派。沖田總司，土方歲三，山南敬助，原田左之助等人暗殺芹澤，近藤勇控制了新選組，成爲領導人(稱爲“局長”)。近藤勇、土方歲三掌握實權，全力鎮壓尊攘、討幕派。
元治元年(1864年)六月五日新選組在池田屋事件中重創了京都倒幕派的力量。新選組在七月的禁門之變中，協助幕府擊退長州藩的倒幕派進攻。這兩次事件使新選組得到朝廷、幕府和會津藩賞賜二百多兩黃金。
同年九月，新選組進行第二次招募隊員，隊員增至超過二百人，駐地從壬生村遷移到西本願寺(京都市下京區)。
慶應三年(1867年)三月，新選組的伊東甲子太郎、藤堂平助一派受命成爲孝明天皇的御陵衛士，脫離新選組，同年十一月被新選組肅清。
